mPEG-CS纳米粒介导livin与survivin小干扰RNA杀伤结肠癌细胞

作者：张阳德; 杨柳青

来源：中国现代医学杂志, 2012, 22(18): 12-17.

• 纳米粒
• 结肠癌
• HT-29
• livin
• survivin
• RNA干扰
• 基因治疗

目的以mPEG-CS纳米粒作为livin基因和survivin基因的干扰RNA的载体,转染人结肠癌细胞HT-29,观察livin和survivin沉默对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响。方法利用离子交联法,制备粒径约60nm的mPEG-CS纳米粒。利用静电吸附法,以纳米粒混悬液与基因溶液配比为3∶1的条件,构建mPEG-CS-livin shRNA纳米粒、mPEG-CS-survivin shRNA纳米粒以及mPEG-CS-(livin shRNA+surviving shRNA)纳米粒,之后,分别转染进人结肠癌HT-29细胞中。利用RT-PCR和Western Blot分别检测livin、survivin基因和蛋白的表达变化;利用MTT法检测livin、survivin基因表达下调对HT-29细胞增殖的抑制效率;利用Hoechst染色检测livin、survivin基因沉默对HT-29细胞凋亡的诱导。结果各干扰组均能在mRNA和蛋白水平上有效抑制HT-29细胞中livin、survivin的表达。MTT和Hoechst染色结果显示,联合干扰livin和survivin基因可有效抑制人结肠癌HT-29细胞的增殖,并促进细胞凋亡,且效果均强于单独干扰livin或sur-vivin基因。结论 mPEG-CS纳米粒介导的livin和survivin双基因干扰能有效降低人结肠癌HT-29细胞中livin和survivin基因的表达,抑制HT-29细胞的增殖,并促进HT-29细胞的凋亡,其效果强于单独干扰livin或survivin基因。双基因联合干扰具有协同增强效应。

• 出版日期2012
• 单位中南大学