带myc标签的人造血相关PBX相互作用蛋白真核表达载体的构建及其功能研究

作者：李玲; 闫志风; 蒋昊; 冯滢滢; 冀全博; 黄蓉; 周丽英; 王鹏; 徐小洁; 叶棋浓

来源：生物技术通讯, 2014, (03): 369-372.

• 造血相关PBX相互作用蛋白
• 克隆
• 真核表达 hematopoietic PBX-interacting protein
• cloning
• eukaryotic expression

目的:构建带myc标签的造血相关PBX相互作用蛋白(HPIP)的真核表达载体,获得myc-HPIP融合蛋白,并对其生物学功能进行初步检测。方法:以本实验室保存的pcDNA3.0-HPIP质粒为模板,采用PCR技术扩增HPIP编码序列,将其插入pXJ-40-myc载体,通过Western印迹检测表达情况;将重组质粒与空载体分别转染人肝癌HepG2细胞,通过Western印迹检测其对AKT、ERK信号通路中AKT、ERK磷酸化水平的影响。结果:双酶切和测序结果表明myc-HPIP真核表达质粒构建成功,转染HepG2细胞后表达了myc-HPIP融合蛋白;Western印迹证明myc-HPIP可升高A...

• 出版日期2014
• 单位中国人民解放军总医院; 中国人民解放军第二炮兵总医院; 中国人民解放军军事医学科学院