摘要

目的探讨叶酸和Vit A对甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N’-nitro-N-nitrosoguanidine, MNNG)诱导的哈萨克族食管上皮DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1, DNMT1)高表达细胞DNMT1酶活性的改变以及MTFHR、P16和RASSF1A基因表达的干预研究。方法在1.500×10-5mol/L MNNG转化浓度、不同浓度叶酸(0.800μg/ml和8.000μg/ml)和Vit A(2.500μg/ml)处理不同时间后,采用实时荧光定量PCR和WB法检测各干预组细胞DNMT1酶活性以及MTFHR、P16和RASSF1A基因表达水平。结果经MNNG、叶酸和Vit A作用细胞一定时间后显示,(1)随着叶酸和Vit A浓度的增加,细胞DNMT1酶活性逐渐降低(F=278.650,P=0.001;F=514.403,P=0.001),但是随着时间的延长细胞DNMT1酶活性逐渐增加(F=619.903,P=0.001),同时三者之间存在交互作用;(2)Vit A和干预时间对P16基因m RNA和蛋白的表达水平有显著影响(F=8.497,P=0.008;F=3.491,P=0.047;F=105.851,P<0.01;F=144.508,P<0.01;F=30.375,P<0.01)。叶酸、Vit A和干预时间对MTFHR和RASSF1A基因m RNA的表达水平无影响,但对其蛋白表达有显著影响,并存在交互作用。结论在MNNG染毒下,叶酸、Vit A和干预时间对DNMT1高表达的哈萨克族食管上皮细胞DNMT1酶活性和P16表达具有一定的干预作用。