Smad3在未足月胎膜早破中的表达及其影响羊膜上皮细胞增殖和凋亡的作用机制研究

作者：王路路; 尹楠林; 刘政; 漆洪波^*

来源：实用妇产科杂志, 2020, 36(08): 621-625.

• Smad3
• 未足月胎膜早破
• 羊膜上皮细胞
• 增殖
• 凋亡

目的:探讨Smad3在未足月胎膜早破(PPROM)胎膜中的表达情况,Smad3对羊膜上皮细胞的生物学行为的影响,及其在未足月胎膜早破发病机制中的作用。方法:收集12例PPROM孕妇(PPROM组)和15例正常足月孕妇(对照组)的胎膜组织,利用蛋白质印迹法比较胎膜组织中的Smad3和磷酸化Smad3(p-Smad3)蛋白表达水平;免疫组织化学方法检测p-Smad3在胎膜组织中的表达及定位;免疫荧光法检测p-Smad3在人羊膜上皮细胞系(WISH)中的表达及定位WISH细胞分为3组:空白对照组(不经任何处理)、阴性对照组及SIS3抑制剂组;Smad3磷酸化特异性抑制剂SIS3处理WISH细胞后,利用Edu方法和流式细胞技术分别检测其对细胞增殖和凋亡的影响;蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白表达的变化。结果:①p-Smad3/Smad3在PPROM组的蛋白相对表达量(1.248±0.140)明显低于对照组(1.579±0.199),差异有统计学意义(P<0.05)。②胎膜组织中p-Smad3主要表达于羊膜上皮细胞和绒毛膜滋养细胞,且在WISH细胞中p-Smad3主要表达于细胞核;③SIS3抑制剂组WISH细胞的增殖能力[(39.094±5.142)%]明显低于对照组[(58.249±6.444)%],差异有统计学意义(P<0.05);④SIS3抑制剂组细胞凋亡水平[(9.623±1.645)%]相较于对照组[(5.080±0.276)%]显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);⑤与阴性对照组比较,p-Smad3水平的降低分别导致cleaved caspase-3蛋白(0.629±0.038 vs 1.084±0.057)和BAX蛋白(0.856±0.052 vs 1.387±0.079)上调,以及BCL-2蛋白下调(0.997±0.048 vs 0.736±0.069),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:p-Smad3蛋白水平的降低可能通过抑制羊膜上皮细胞的增殖、促进其凋亡而参与未足月胎膜早破的发生,其机制可能与上调BAX、下调BCL-2的表达相关。

• 出版日期2020
• 单位重庆医科大学附属第一医院