H9亚型鸭源禽流感病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR快速检测方法的建立

作者：万春和; 林甦; 施少华; 林秋敏; 陈红梅; 程龙飞; 傅光华; 林芳; 林建生; 黄瑜

来源：福建农业学报, 2010, (04): 387-391.

DOI：10.19303/j.issn.1008-0384.2010.04.001

• H9亚型禽流感病毒
• SYBR GreenⅠ
• 实时荧光定量PCR(RRT-PCR) H9 subtype avian influenza virus
• SYBR Green I
• RRT-PCR

针对H9亚型禽流感HA基因保守序列设计引物,建立基于SYBR GreenⅠ检测模式的荧光定量RT-PCR(real-ti me RT-PCR,RRT-PCR),最低检测限为8.33×102拷贝质粒DNA,与常规PCR相比,灵敏度高出100倍。扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,Tm值为(83.83±0.22)℃,组内变异系数为0.52%~1.48%,组间变异系数为0.71%~2.21%,可重复性好;对H5亚型禽流感病毒、鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒、鸭源禽1型副粘病毒无扩增;检测速度快,从样本处理到报告结果仅需4.5 h。

• 出版日期2010
• 单位福建省农业科学院