牛皮蝇HA基因克隆及分泌型真核表达载体的构建

作者：陈仁金; 胡安康; 王珍珍; 袁红花; 张腾业; 吴连连; 朱裕华; 朱孝荣

来源：黑龙江畜牧兽医, 2014, (03): 28-30+34+204.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2014.03.027

• 牛皮蝇
• 宿主
• 真核表达载体
• HA基因
• 载体构建
• 基因表达 Hypoderma bovis
• host
• eukaryotic expression vector
• HA gene
• vector construction
• gene expression

为了构建牛皮蝇的皮蝇素A(hypodermin A,HA)基因的分泌型真核表达载体pEF1α-HAAcGFP,并在Cos7细胞中表达与鉴定,试验从牛皮蝇中提取RNA,反转录成cDNA,扩增出HA基因,并在HA基因序列的上游加1段信号肽序列;通过双酶切将带有信号肽的HA基因序列克隆到真核表达载体pEF1α-IRES-AcGFP中,得到分泌型真核表达载体pEF1α-HA-AcGFP;再利用脂质体法转染Cos7细胞,并以RT-PCR和Western-blot技术在RNA和蛋白水平上检测HA基因是否在Cos7细胞中表达。结果表明:经双酶切及测序鉴定,分泌型真核表达载体pEF1α-HA-AcGFP构建成...

• 出版日期2014
• 单位徐州医科大学