猕猴桃ACC氧化酶反义基因转化猕猴桃的研究

作者：田宏现; 苑平; 王曼玲; 刘艺; 李菁; 夏新界; 谭晓风

来源：中南林业科技大学学报, 2012, 32(11): 115-121.

DOI：10.14067/j.cnki.1673-923x.2012.11.027

• 猕猴桃
• ACC氧化酶
• 农杆菌介导
• 反义表达载体

为建立猕猴桃ACC氧化酶反义基因功能研究技术平台并通过生物技术改良猕猴桃,从海沃德猕猴桃(Actinidia chinensis Planch.var.deliciosa‘Hayward’)叶片中提取总RNA,反转录合成cDNA第一链,并以此为模板,扩增得到ACC氧化酶(ACO)基因片段约1 kb,经限制性内切酶图谱分析,组建亚克隆并进行测序,其开放阅读框长957 bp,编码319个氨基酸,与其他已公布的ACC氧化酶cDNA的核苷酸(AB003514.1)及氨基酸序列(BAA21541.1)同源率分别高达94.0%和95.6%,证明所克隆的cDNA序列的准确性。构建该基因的反义表达载体,并通过农杆菌介导的方法成功转化米良一号猕猴桃(Actinidia deliciosa cv.Miliang-1),得到再生苗。取14株经PCR检测,其中10株检测到ACC氧化酶基因目的条带,阳性植株占71.4%。实时荧光定量PCR分析结果显示,再生苗ACO基因的表达量低于野生型58%～81%。

• 出版日期2012
• 单位吉首大学; 中国科学院亚热带农业生态研究所; 中南林业科技大学