木聚糖酶XYNB分子中折叠股B1和B2间的疏水作用对酶热稳定性的影响

作者:杨浩萌; 姚斌; 罗会颖; 张王照; 王亚茹; 袁铁铮; 柏映国; 伍宁丰; 范云六
来源:生物工程学报, 2005, (03): 414-419.
DOI:10.13345/j.cjb.2005.03.016

摘要

对来源于Streptomycesolivaceoviridis的高比活木聚糖酶XYNB进行同源建模,并结合嗜热木聚糖酶氮末端芳香族氨基酸疏水作用的结构分析,设计了XYNB的T11Y定点突变,观察XYNB分子中折叠股B1和B2的疏水作用对酶的热稳定性的影响。将突变酶XYNB′在毕赤酵母中表达,表达的XYNB′经纯化后与原酶XYNB(同样经毕赤酵母表达后纯化)进行酶学性质比较,结果表明,XYNB′的耐热性比XYNB有明显的提高,但最适温度与原酶一样为6 0℃。另外,XYNB′的最适pH、Km值及比活性均有一定的改变。实验证实了木聚糖酶XYNB的氮端芳香族氨基酸之间的疏水相互作用与其热稳定性相关,为...

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