微小隐孢子虫LAMP检测方法的探索

作者：史亚东; 董海聚; 王荣军; 张龙现; 宁长申; 菅复春

来源：中国人兽共患病学报, 2012, (12): 1195-1201.

• 微小隐孢子虫
• 环介导等温扩增
• 检测
• PCR Cryptosporidium parvum
• loop-mediated isothermal amplification(LAMP)
• detection
• PCR

目的为快速检测微小隐孢子虫,建立并优化了以SYBR Green I显色的环介导等温扩增快速检测隐孢子虫的方法。方法根据微小隐孢子虫18SrRNA基因的4条特异LAMP引物,设计2条环引物,建立了微小隐孢子虫LAMP检测方法。结果该方法省去95℃热变性和80℃酶失活过程,其最佳反应温度和时间是63℃和60min,Betaine、MgSO4、dNTP Mixture、Bst DNA聚合酶大片段的最佳浓度分别是0.8mol/L、8mmol/L、0.8mmol/L、8U/25μL,内外引物浓度分别为1.2μmol/L、0.2μmol/L,添加环引物后体系反应时间缩短为20min。对贾第虫、肠阿米巴、柔...

• 出版日期2012
• 单位河南农业大学