启动子及信号肽筛选提高普鲁兰酶在地衣芽孢杆菌中的表达

作者：王倩; 初晓宇; 朱宝成^*; 伍宁丰^*

来源：中国农业科技导报, 2019, 21(06): 61-69.

DOI：10.13304/j.nykjdb.2019.0195

• 地衣芽孢杆菌
• 普鲁兰酶
• 启动子
• 信号肽

普鲁兰酶(pullulanase)是一种淀粉脱支酶,在淀粉糖化加工等工业生产中具有重要的应用价值。选用地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis) BL10作为表达宿主,为了提高其中的普鲁兰酶产量,对来自枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) 168和地衣芽孢杆菌BL10中的15种不同信号肽以及4种不同启动子进行筛选,构建了不同的重组工程菌株,最终发现在以P43为启动子、apr为信号肽的条件下,上清液中普鲁兰酶的表达量最高,酶活可达12 U/m L,且测得其最适反应温度为60℃,最适p H为4.5。结果表明通过对启动子及信号肽进行筛选是提高重组工程菌株中目的蛋白表达量的一种有效手段。

• 出版日期2019
• 单位生命科学学院; 中国农业科学院生物技术研究所; 河北农业大学