抗增殖蛋白抑制转化生长因子-β1诱导的肾脏成纤维细胞增殖和表型改变

作者：郭维; 徐虹; 黄文彦; 陈径; 杨勇; 傅睿; 刘海梅; 查锡良; 张志刚

来源：中华医学杂志, 2007, 87(24): 1660-1665.

DOI：10.3760/j:issn:0376-2491.2007.24.002

• 转化生长因子β
• 成纤维细胞
• 表型
• 抗增殖蛋白

目的研究抗增殖蛋白(prohibitin,PHB)在肾间质纤维化发生中的作用。方法 (1)检测48例原发性肾小球肾炎患儿肾组织中 PHB 蛋白表达,并比较其与肾小管间质损伤程度的相关性。(2)观察 PHB 在大鼠肾脏成纤维细胞(NRK-49F)中亚细胞定位,以 Western 印迹和 RT-PCR 测定NRK-49F 受到转化生长因子β1(TGF-β1)刺激后 PHB 表达的变化。(3)构建 PHB 表达质粒并转染,观察 PHB 对 NRK-49F 细胞周期以及表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白质和 mRNA 的影响。结果(1)PHB 蛋白主要表达于肾间质细胞和肾小管上皮细胞的胞质,随肾小管间质损伤程度加重而逐渐减弱(组间比较,均 P<0.01),PHB 表达量与肾小管间质损伤程度显著负相关(r=-0.802,P<0.01)。(2)激光共焦显微镜下见 PHB 主要分布于 NRK-49F 的细胞质,细胞核亦有较弱表达。TGF-β1刺激后 PHB 蛋白和 mRNA 表达均下调,呈现时间和剂量依赖关系(组间比较,P<0.01)。(3)成功构建 PHB 真核表达质粒,转染48h 细胞中 PHB 蛋白量升高约2.54倍(与未转染组比较,P<0.01)。(4)转染 PHB 基因明显抑制 TGF-β1所诱导的细胞增殖,使更多的细胞处于 G_0/G_1期(与FGF-β1组比较,P<0.01),而对未受刺激的细胞无影响(P>0.05)。(5)转染 PHB 基因明显抑制TGF-β1所诱导的α-SMA 蛋白质和 mRNA 表达(与 TGF-β1组比较,P<0.01),而对α-SMA 基础表达无影响(与 FGF-β1组比较,P>0.05)。结论 PHB 在肾组织中的表达水平可以反映肾小管间质损伤程度,外源性 PHB 显著抑制 TGF-β1诱导的成纤维细胞增殖和表型改变。

• 出版日期2007
• 单位复旦大学; 复旦大学附属儿科医院