禽坦布苏病毒截短E蛋白单克隆抗体的制备及其抗原性分析

作者：**丹; 张曦; 郎咸勇; 黄孝志; 莫开昆; 周继勇; 廖敏

来源：中国兽医科学, 2016, (07): 805-813.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2016.07.001

• 坦布苏病毒
• 截短囊膜E蛋白
• 单克隆抗体
• 抗原性 Tembusu virus(TMUV)
• truncated envelope protein E
• monoclonal antibody
• antigenicity

为制备禽坦布苏病毒囊膜E蛋白截短蛋白的单克隆抗体并分析其抗原性,以坦布苏病毒YY1分离株的cDNA为模板,通过RT-PCR扩增编码截短E蛋白的基因,并将其成功克隆到原核表达载体pET-28a(+)中。重组载体pET-28a(+)-YY1E转化的大肠杆菌BL21(pLysS)在IPTG诱导下高效表达重组蛋白His-YY1E,该蛋白可与坦布苏病毒感染鸭的血清反应。用纯化的His-YY1E免疫小鼠制备单克隆抗体,采用有限稀释法经过3轮筛选和鉴定最终获得了2株分泌抗E蛋白的单克隆抗体细胞株1C5和3B11。制备的单克隆抗体与原核表达和病毒感染细胞中的E蛋白均能反应。进一步通过转染截短蛋白E不同区域截短...

• 出版日期2016
• 单位浙江大学