牙龈卟啉单胞菌外膜蛋白3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

作者：李昂; 徐红艳; 石建峰; 朱春晖; 饶国洲; 苟建重

来源：华西口腔医学杂志, 2011, 29(02): 199-202.

• 牙龈卟啉单胞菌
• 3-磷酸甘油醛脱氢酶
• 原核表达 Porphyromonas gingivalis
• glyceraldehydes 3-phosphate dehydrogenase
• prokaryotic expression

目的克隆牙龈卟啉单胞菌外膜蛋白3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH),并将其置于大肠杆菌中作融合表达。方法利用PCR技术,克隆GAPDH,插入克隆载体pMD18-T中得到克隆重组子pMD18-T-GAPDH。克隆重组子与表达载体pET-32a双酶切后连接构建表达质粒pET-32a-GAPDH。重组原核表达质粒经酶切鉴定后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,以不同浓度异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白。结果核酸序列测定与分析表明:表达重组子pET-32a-GAPDH与NCBI核酸数据库中收录的GAPDH序列同源性达99.802%;在最佳浓度的IPTG诱导下,GAPDH可高效表达。结...

• 出版日期2011
• 单位西安交通大学