牛白细胞介素2基因原核表达及多克隆抗体制备

作者：盖仁华; 王衡; 郎跃深; 李广兴; 张瑞莉; 马德星; 张国庆; 杨贵君

来源：中国畜牧兽医, 2011, (12): 71-75.

• 白细胞介素-2
• 原核表达
• 多克隆抗体 interleukin-2
• expression
• polyclonal antibody

根据GenBank发表的牛白细胞介素2(BoIL-2)基因序列,设计1对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增出重组牛白细胞介素2(rBoIL-2)基因。将克隆片段与pMD18-T载体连接,并经过酶切及PCR鉴定,测序结果显示,克隆的BoIL-2基因与GenBank发表的BoIL-2基因序列同源性为98.7%。将测序正确的克隆片段与pET30a(+)载体连接,构建重组表达质粒pET30a(+-)rBoIL-2,通过双酶切及PCR鉴定阳性的重组质粒进行序列测定后在大肠杆菌的表达,分子质量约为23.49ku;表达产物主要分布在包涵体中。Western blotting证实所得到的重组蛋白为BoIL-...

• 出版日期2011
• 单位华南农业大学; 浙江大学; 东北农业大学