构建人三叶因子3腺病毒载体对胆管上皮细胞迁移的调控作用

作者：田驹; 程哲; 郑树国

来源：第三军医大学学报, 2013, (04): 297-301.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2013.04.005

• TFF3基因
• 腺病毒载体
• 重组
• 损伤修复
• 细胞迁移 trefoil factor family 3
• adenovirus vector
• recombination
• wound healing
• cell migration

目的构建含有人三叶因子3(trefoil factor family 3,TFF3)基因的腺病毒载体,并观察其对胆管上皮细胞迁移的调控作用。方法利用PCR技术对目的基因TFF3全长进行扩增,测序后亚克隆至腺病毒穿梭质粒构建载体pAdTrack-CMV-TFF3,转化至含腺病毒骨架质粒pAd-Easy的大肠杆菌株BJ5183感受态细胞中进行同源重组,筛选重组子并经内切酶PacⅠ线性化,转染293细胞进行病毒包装及扩增,并进行滴度测定。构建的TFF3腺病毒载体感染人胆管上皮细胞后用RT-PCR及Western blot检测目的基因表达水平,并进行划痕实验观察细胞迁移能力的变化。结果成功扩增了大小约...

• 出版日期2013
• 单位中国人民解放军陆军军医大学