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摘要
目的：阐明白皮杉醇对抗脑缺血再灌注损伤的作用及机制。方法：构建氧糖剥夺再灌注（OGD/R）神经细胞模型，于氧糖剥夺2 h后给予白皮杉醇处理细胞24 h，采用MTT法检测细胞存活率，细胞内乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测细胞损伤程度，比色法检测细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性和三磷酸腺苷（ATP）含量，流式细胞术和倒置荧光显微镜检测细胞活性氧水平，透射电子显微镜观察神经细胞线粒体超微结构，JC-1探针法检测线粒体膜电位，蛋白质印迹法检测蛋白激酶B(AKT)与糖原合成酶激酶（GSK）-3β的磷酸化水平，免疫荧光染色法观测细胞核转录因子红系2相关因子（Nrf）2核定位。采用上述方法观察Nrf2抑制剂ML385预处理24 h对白皮杉醇改善OGD/R神经细胞活性、抗氧化性作用的影响，并采用蛋白质印迹法检测Nrf2、血红素加氧酶1、醌氧化还原酶1的表达水平。结果：白皮杉醇可以显著提高OGD/R神经细胞存活率、减少LDH释放和活性氧水平、提高SOD活性、改善线粒体超微结构损伤、提高线粒体膜电位和ATP水平（均P<0.05），增强AKT与GSK-3β蛋白的磷酸化水平，上调Nrf2、血红素加氧酶1、醌氧化还原酶1蛋白表达，提高细胞Nrf2的核浆比，促进Nrf2核转入（均P<0.05）；而ML385可以显著逆转白皮杉醇对模型细胞的挽救作用及对SOD、活性氧和LDH的调节活性（均P<0.05）。结论：白皮杉醇可通过激活GSK-3β，靶向调控Nrf2，促进其核转入，发挥相应抗氧化效应，并保护线粒体结构与功能。
- 出版日期2022
- 单位浙江中医药大学
