改进型外部引导序列抑制人巨细胞病毒UL49基因的表达(英文)

作者：周琪; 曾志锋; 李弘剑; 李月琴; 崔延伟; 杨丹; 邹奕; 杨光; 周天鸿

来源：中国生物化学与分子生物学报, 2009, (06): 522-527.

• 外部引导序列(EGS)
• 核酶P
• 人巨细胞病毒
• 基因沉默 external guide sequence (EGS)
• RNase P
• human cytomegalovirus
• gene silence

外部引导序列(EGS)技术(The EGS-based technology)是一种新型的基因沉默技术,能诱导内源性的核酶P(RNase P)对靶mRNA进行有效切割.以人类巨细胞病毒(HCMV)UL49基因mRNA片段为靶序列,基于前人实验基础上设计出更为精简与高效的改进型EGS(miniEGS),DNA片段长度仅为12bp.构建稳定表达HCMVUL49的细胞系,通过应用荧光定量PCR及Western印迹分别鉴定miniEGS对内源性UL49的抑制效率.结果显示,miniEGS能在HeLa细胞中能达到很高的转染效率(97.9%),并且在转染稳定表达UL49的HeLa细胞系后,发现UL49基因的mRNA与蛋白表达水平都出现明显下降(50%).研究表明,改进型的EGS序列不仅能有效抑制目的基因的表达,同时因其序列设计的精简性与高效性,可更好地应用到以后的抗病毒研究中.

• 出版日期2009
• 单位暨南大学