青天葵甲醇提取物通过ERK信号通路诱导鼻咽癌CNE-2细胞凋亡

作者:李亚洲; 周燕园*; 白红妍; 董哲文; 林雯; 付红红; 董玲; 廖燕梅; 吕良*
来源:中国现代应用药学, 2021, 38(16): 1928-1933.
DOI:10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2021.16.002

摘要

目的研究青天葵甲醇提取物(Nervilia fordii methanol extracts,NFME)体外对鼻咽癌CNE-2细胞的凋亡作用及其作用机制。方法 MTT法检测不同浓度(0,0.25,0.5,1,2,3mg·mL-1)的NFME处理CNE-2细胞24,48h对CNE-2细胞生长抑制率的影响;克隆原形成试验观察NFME对CNE-2细胞克隆形成率的影响;Hoechst凋亡染色观察NFME对CNE-2细胞凋亡的影响;Westernblotting测定NFME作用下caspase-3、ERK1/2和c-Raf蛋白磷酸化水平的变化。结果 MTT试验结果显示,与对照组相比,在给药24 h时0.5 mg·mL-1的NFME就能抑制CNE-2细胞的增殖(P<0.05),抑制率为12.64%。而在给药48 h时0.25 mg·mL-1的NFME就能抑制CNE-2细胞增殖(P<0.05),抑制率为22.43%;克隆原形成能力试验表明,0.25mg·mL-1的NFME能够抑制CNE-2细胞集落的形成(P<0.05);Hoechst33258凋亡染色观察到0.25 mg·mL-1的NFME作用24 h能够观察到CNE-2细胞发生凋亡(P<0.05),凋亡率达到17.91%;Western blotting结果表明0.5mg·mL-1的NFME能使CNE-2细胞中caspase-3发生剪切,随着给药浓度增加其剪切作用越明显(P<0.01),同时0.5 mg·mL-1的NFME能够降低CNE-2细胞中ERK1/2和c-Raf蛋白的磷酸化水平(P<0.05)。结论青天葵甲醇提取物能抑制鼻咽癌CNE-2细胞的增殖并诱导其发生凋亡,其作用机制可能与抑制ERK信号通路有关。

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