AKAP1在高糖诱导的足细胞线粒体分裂中的作用

作者：陶娱; 马屹茕; 陈朝威; 杨倩; 丁国华^*

来源：中华肾脏病杂志, 2018, 34(07).

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-7097.2018.07.008

• 足细胞
• 线粒体
• 糖尿病肾病
• A激酶锚定蛋白1
• 动力相关蛋白1

目的研究A激酶锚定蛋白(AKAP1)在高糖诱导足细胞线粒体分裂中的作用及可能的信号转导通路。方法体外培养条件永生性人足细胞, 完全分化并同步化处理后进行后续实验。实验分组:(1)葡萄糖浓度分为5、15、25、35 mmol/L组刺激足细胞48 h;(2)高糖(35 mmol/L)培养基分别刺激足细胞12、24、36、48 h;(3)正常对照组(5 mmol/L葡萄糖)、高渗对照组(30 mmol/L甘露醇+5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(35 mmol/L葡萄糖)、高糖(35 mmol/L葡萄糖)+AKAP1 siRNA组。免疫荧光染色检测足细胞中AKAP1的表达和分布, Western印迹检测足细胞中AKAP1、线粒体动力相关蛋白1(dynamin related protein1, Drp1)、p-Drp1蛋白水平。Mitotracker Red染色观察各组足细胞线粒体形态, 对长度、纵横比、形状系数定量分析。流式细胞术评价足细胞凋亡水平。结果与正常组比较, 高糖刺激导致足细胞凋亡增加(P<0.05), 线粒体分裂增加、纵横比及形状系数降低(均P<0.05), AKAP1蛋白表达水平、p-Drp1/Drp1以时间、浓度依赖方式增加(P<0.05);与高糖组比较, AKAP1 siRNA转染后线粒体分裂减少, 线粒体纵横比及形状系数升高(均P<0.05), 足细胞凋亡减少;AKAP1蛋白水平及p-Drp1/Drp1下降(P<0.05);上述各项高渗对照组与正常对照组差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论高糖刺激下AKAP1可能通过线粒体Drp1调控足细胞线粒体分裂, 导致足细胞损伤。

• 出版日期2018
• 单位武汉大学人民医院