蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型12与心脏HERG钾通道相互作用

作者：林吉进; 刘树楷; 武君; 李妍妍

来源：中国分子心脏病学杂志, 2010, (03): 147-151.

DOI：10.16563/j.cnki.1671-6272.2010.03.006

• HERG
• 钾通道
• 蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型12
• 蛋白质-蛋白质相互作用
• 酵母双杂交 HERG potassium channel
• PTPN12
• Protein-protein interaction
• Yeast two-hybrid

目的鉴定HERG钾通道的相互作用蛋白,并进一步研究该相互作用蛋白对HERG钾通道的功能调控。方法 (1)应用酵母双杂交技术,构建含有HERG氨基末端的诱饵载体,将转染有诱饵载体的酵母菌AH109与预转染有人类cDNA文库的Y187酵母菌进行双杂交,初步筛选出HERG的相互作用蛋白;(2)应用免疫共沉淀技术进一步验证酵母双杂交所筛选蛋白与HERG之间的相互作用;(3)GSTpull-down分析:应用GST-HERGT-NT融合蛋白和谷光苷肽-琼脂糖4B小球从大鼠心肌裂解物中沉淀蛋白质,应用抗PTPN12抗体对沉淀物进行WesternBlot分析;(4)免疫荧光组织化学分析:应用抗PTPN12和...

• 出版日期2010
• 单位广东省人民医院; 广东省心血管病研究所; 汕头大学