科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的应用基因克隆技术构建雌激素受体β1(ERβ1)及其5-8外显子缺失变异体ERβ△5-8(文中简称ERβ△),为ERβ功能的研究奠定基础。方法组织中提取总RNA,RT-PCR法扩增基因ERβ1及ERβ△,限制性酶切并克隆于以带EGFP绿色荧光基因及Myc报告基因的非融合真核细胞表达质粒IRES2-EGFP,菌群转化扩增后琼脂糖凝胶电泳,限制性酶切后行DNA测序鉴定。结果 PCR扩增及限制性酶切法证实重组真核表达质粒的构建成功。测序表明ERβ1长度为1593 bp,ERβ△长度为972 bp,与GeneBank上公布的蛋白编码区序列一致。结论成功构建ERβ1基因及其剪切变异体ERβ△真核表达载...
