ERK2的CC区域在HeLa细胞中的定位作用

作者：张斌; 王伟; 凡进; 李翔; 张宁; 范卫民; 殷国勇

来源：江苏医药, 2011, 37(06): 630-632+616.

DOI：10.19460/j.cnki.0253-3685.2011.06.004

• 细胞外调节蛋白激酶2
• G蛋白耦联受体激酶相互作用分子1
• 细胞迁移

目的探索细胞外调节蛋白激酶2(ERK2)的coiled-coil(CC)区域在表皮生长因子(EGF)所诱导的HeLa细胞中的定位作用。方法用定点突变试剂盒删除ERK2的盘绕结构[ERK2(del CC)],免疫共沉淀的方法检测ERK2(del CC)在EGF刺激的条件下和G蛋白耦联受体激酶相互作用分子1(GIT1)的相互关系,免疫荧光染色检测ERK2(del CC)在细胞内的位置以及和GIT1的相互关系。结果成功删除ERK2的CC区域;免疫共沉淀结果显示,删除ERK2的CC区域显著抑制了ERK2和GIT1在EGF刺激条件下的相互结合;免疫荧光染色结果显示,删除ERK2的CC区域显著抑制了磷酸化的ERK2在细胞局部黏附内的定位。结论在EGF的刺激条件下,增加了ERK2和GIT1的相互结合,ERK2的CC区域是与GIT1相互结合的重要区域。删除ERK2的CC区域不仅显著抑制了ERK2和GIT1的相互结合,而且明显降低ERK2在细胞局部黏附内的定位。

• 出版日期2011
• 单位南京市六合区人民医院; 南京医科大学第一附属医院