全长hPPARγ重组蛋白的可溶性表达、纯化及活性鉴定

作者：夏铸; 丁惠惠; 张万萍; 余瑜

来源：光谱实验室, 2013, (02): 555-560.

• 全长hPPARγ重组蛋白
• 纯化
• 活性 Full Length hPPARγ
• Purification
• Biological Activity

建立细菌外源性表达的有活性的全长hPPARγ重组蛋白的纯化方法。利用pReceiver-B13-SUMO-PPARγ表达质粒转化至E.coli BL21(DE3)细胞中诱导表达获得的全长hPPARγ重组蛋白;采用阴离子交换色谱法纯化目标蛋白;采用分子排阻色谱-高效液相色谱法(SEC-HPLC)法测定全长hPPARγ重组蛋白与Ros(Rosiglitazone,罗格列酮)配体的结合活性。经DEAE-52阴离子交换树脂一次纯化,从每升LB培养介质中可获得135mg、纯度为80%目标蛋白;该蛋白与罗格列酮的解离常数K_d为492nmol/L。本文所建立的方法能纯化出大量有活性、纯度较高的全长hPPA...

• 出版日期2013
• 单位重庆医科大学附属第一医院; 重庆医科大学附属第二医院; 重庆医科大学