摘要
以东亚飞蝗为材料,对蝗虫基因组DNA双酶切的反应体系及条件进行研究。结果表明,采用PstⅠ和TaqⅠ双酶切系统,建立含Template DNA 2μl、PstⅠ引物(30 ng/μl)2.5μl、TaqⅠ引物(30 ng/μl)2.5μl、dNTPs(ATP,GTP,CTP,TTP各10 mmol/L)0.4μl、MgCl2(25 mmol/L)1.2μl、Taq DNA polymerase(5U/lμ)0.2μl、10×Taq DNA polymerase buffer 2μl的20μl反应系统,在适当的反应条件下进行预扩增和扩增,可以得到理想的目的片段。这为蝗虫AFLP分子标记的获得和进一步研究提供了必要条件,也为AFlP技术在其他昆虫及动物研究中的应用提供依据。
- 出版日期2006
- 单位河南农业大学; 河南牧业经济学院