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摘要
对棉花DNA提取程序和SSR反应体系进行了研究。利用正交设计对模板DNA、引物、Taq酶和Mg2+浓度4种成分以3个梯度进行优化和选择,结果表明,最优反应体系为15μL,其中含有:10×Taqbuffer 1.5μL、Mg2+(25 mmol/μL)1.5μLd、NTPs(25 mmol/μL)2.0μL、引物(20 pmol/μL)各2.0μL、Taq酶(2.0U/μL)0.15μL、DNA模板(25 ng)3.0μL、ddH2O补至15μL。采用建立的反应体系,利用8对引物对3个品种进行扩增,6%的变性聚丙烯酰氨凝胶电泳检测结果显示该体系扩增结果清晰稳定。
