摘要

Rdrlec是从中国林蛙基因组中克隆得到的核糖核酸酶新基因(GenBank登录号EU384704),其生物学活性仍未知。为了探索其编码的蛋白产物的生物学活性,将此基因按照大肠杆菌偏好的密码子进行优化后,人工合成基因,通过EcoR I和HindIII限制酶位点定向克隆到pET-28a(+)中构建重组表达载体,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,在34℃以0.5 mmol/L IPTG诱导表达出包涵体形式的融合蛋白,通过包涵体复性、肠激酶切割、Ni-NTA亲和层析纯化等步骤获得了具有酶活性的野生型Rdrlec重组蛋白,并检测到其对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有显著的抗菌活性。

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