摘要

工业微生物菌种改良技术经历了诱变、遗传重组和基因工程技术改良菌种等三个发展阶段,第二代基因工程技术——基因打靶技术具有定位性强、打靶后新基因随染色体DNA稳定遗传的特点,使人们可以有目的地去改造生物的遗传物质,创造有利于生产的微生物新品种。重组工程技术是在大肠杆菌体内利用一个独立噬菌体重组系统,使用40~60bp的同源序列,高效催化线性打靶DNA片段与染色体DNA或质粒载体上的靶基因发生同源重组,对靶基因进行精确修饰。利用重组工程技术构建的打靶载体的同源序列长度可达10kb以上,甚至100kb以上,大大提高了同源重组的效率。重组工程技术具有完全取代传统DNA重组技术的趋势,为微生物的基因打靶技术提供了一个全新、高效手段,广泛应用在微生物菌种改良的基础理论研究和实际应用领域。