高效絮凝素毕赤酵母表面展示系统的构建

作者：韩双艳; 韩振林; 林影; 郑穗平

来源：生物化学与生物物理进展, 2010, (02): 200-207.

• 酵母表面展示
• 毕赤酵母
• 米黑根毛霉脂肪酶
• N端锚定系统
• C端锚定系统 yeast cell-surface display
• Pichia pastoris
• Rhizomucor miehei lipase
• N-terminal anchor system
• C-terminal anchor system

为了获得高效的脂肪酶毕赤酵母表面展示系统,利用来自酿酒酵母絮凝素蛋白Flo1的N端874个氨基酸残基(FS)和C端的1101个氨基酸残基(FL)作为锚定蛋白分别构建了2套载体系统.带有前肽的米黑根毛霉脂肪酶(ProRML)克隆到构建的2套展示载体中,使米黑根毛霉脂肪酶(RML)分别以N端锚定或C端锚定的方式实现在毕赤酵母细胞表面的展示.利用RMLC端的Flag标签,通过流式细胞术和激光扫描共聚焦显微镜检测2套系统中RML在酵母表面的展示情况.研究发现,N端锚定于酵母表面的展示酶FSR以pNPC为底物时,水解活力达到了105.3U/g,大约为C端锚定的展示酶FLR活力的2倍.同时FSR比FLR具...

• 出版日期2010
• 单位华南理工大学