蓝藻抗病毒蛋白-N基因的克隆、表达、纯化及活性鉴定

作者：陈伟; 韩波; 钱垂文; 刘秋英; 熊盛

来源：生物工程学报, 2010, (04): 538-544.

DOI：10.13345/j.cjb.2010.04.007

• 蓝藻抗病毒蛋白-N
• 表达
• 纯化
• HSV-1
• HIV-1 cyanovirin-N
• expression
• purification
• HSV-1
• HIV-1

蓝藻抗病毒蛋白-N(Cyanovirin-N,CVN)具有强效抗HIV及其他包膜病毒活性,该蛋白序列特殊,难以重组制备,在大肠杆菌细胞质中形成包涵体。本研究根据大肠杆菌密码子偏好性对CVN原始核苷酸序列进行优化,通过多次PCR合成SUMO-CVN的全长DNA序列,构建pET3c-SUMO-CVN重组表达质粒,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),获得表达菌株。通过对诱导剂浓度和诱导时间的优化,发现以0.5mmol/LIPTG在20℃诱导24h可获得最高表达,SDS-PAGE结果显示,SUMO-CVN为可溶性表达,表达量占菌体总蛋白的28%;经特异性的SUMO蛋白酶对融合蛋白进行酶切及两步Ni...

• 出版日期2010
• 单位暨南大学