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摘要
目的通过凝胶免疫法制备抗狂犬病病毒糖蛋白单链抗体Fv57的多克隆抗体。方法诱导表达Fv57蛋白,SDS-PAGE分离后,分别以KCl和考马斯亮蓝R-250染色,切取含目的蛋白的凝胶,经背部皮下免疫家兔,共免疫4次。第4次免疫后1周采血,分离血清,Western blot分析Fv57蛋白多克隆抗体的特异性,ELISA检测抗体效价。结果表达的Fv57蛋白相对分子质量约26 000;两种染色方法制备的多抗均能与Fv57蛋白特异性结合,与考马斯亮蓝R-250染色法相比,KCl法的非特异性杂带较少,结合效果更好;两种方法制备的多抗效价均在1∶10 000以上。结论 已成功采用凝胶免疫法制备了Fv57多克隆抗体,为检测Fv57与狂犬病病毒糖蛋白的特异性结合奠定了基础。
- 出版日期2011
- 单位吉林大学第一医院; 生命科学学院; 吉林大学
