基于骨膜素探讨黄芪甲苷对低氧诱导肺动脉高压小鼠的保护作用及机制

作者：范思祺; 鲁美丽; 王洪新^*; 刘羽; 王玥; 孟岩; 赵芳

来源：中药新药与临床药理, 2023, 34(01): 16-24.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2023.01.003

• 黄芪甲苷
• 低氧
• 骨膜素
• 肺动脉高压
• 血管重构
• 纤维化
• 细胞外基质
• 小鼠

目的 探讨黄芪甲苷对低氧诱导肺动脉高压(PAH)小鼠的保护作用及作用机制。方法 将60只昆明种小鼠随机分为空白组、模型组及黄芪甲苷低、中、高剂量组(40、80、120 mg·kg-1)。将小鼠置于氧浓度恒定为10%的常压低氧舱中持续饲养4周建立PAH模型，造模同时灌胃给药，每日1次。4周后检测各组小鼠的血流动力学指标[右心室收缩压(RVSP)、平均肺动脉压(mPAP)]及右心室肥厚指数(RVHI)；采用HE染色法评估肺小动脉病理性重构；免疫荧光法检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达；Masson染色法观察肺组织纤维化程度，计算胶原容积分数(CVF);ELISA法检测血清和肺组织匀浆中羟脯氨酸(HYP)的含量；免疫组织化学法检测肺组织中骨膜素(Periostin)表达情况；Western Blot法检测肺组织中纤维化相关蛋白表达水平。结果 与空白组比较，模型组小鼠的mPAP、RVSP、RVHI均显著升高(P<0.01)；肺小动脉壁明显增厚，管腔狭窄，组织间隙变小，血管周围有明显炎性细胞浸润，有血管重塑表现，管壁厚度占外径的百分比(WT%)、管壁面积占血管总面积的百分比(WA%)显著升高(P<0.01)；小鼠肺组织的α-SMA荧光强度明显增强，肺小动脉平滑肌层增厚，完全肌化肺小血管比例显著升高(P<0.01)；肺组织的蓝色胶原沉积明显增多，CVF显著升高(P<0.01)；血清和肺组织匀浆中HYP含量显著升高(P<0.01)；小鼠肺组织中骨膜素阳性表达显著上调(P<0.01)；肺组织中Periostin、MMP-9、TIMP-1、TGF-β1、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ蛋白表达显著上调(P<0.01),Smad2/3磷酸化水平及MMP-9/TIMP-1比例显著升高(P<0.01)。与模型组比较，黄芪甲苷低、中、高剂量组小鼠的m PAP、RVSP、RVHI均显著降低(P<0.01)；小鼠的血管壁增厚情况有显著改善，WT%、WA%均明显降低(P<0.01)；小鼠肺组织的α-SMA荧光强度明显降低，肺小动脉平滑肌层变薄，完全肌化肺小血管比例显著降低(P<0.01)；肺组织的蓝色胶原沉积明显减少，CVF明显降低(P<0.05,P<0.01)；血清和肺组织匀浆中HYP含量明显降低(P<0.05,P<0.01)；小鼠肺组织中骨膜素阳性表达明显下调(P<0.05,P<0.01)；肺组织中Periostin、MMP-9、TIMP-1、TGF-β1、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01),Smad2/3磷酸化水平及MMP-9/TIMP-1比例显著下降(P<0.01)。结论 黄芪甲苷能够改善低氧诱导的PAH小鼠的肺动脉压升高、血管重构以及纤维化，其机制可能与下调骨膜素及纤维化相关蛋白表达，调节细胞外基质平衡有关。

• 出版日期2023
• 单位锦州医科大学