草菇锰超氧化物歧化酶基因异源表达条件优化及其耐胁迫功能分析

作者：杨焕玲; 游华芳; 赵妍^*; KAKUMYAN Pattana; 常婷婷; 余昌霞; 陈明杰^*

来源：食用菌学报, 2020, 27(04): 51-58.

DOI：10.16488/j.cnki.1005-9873.2020.04.005

• 草菇
• 锰超氧化物歧化酶
• 异源表达
• 耐胁迫

根据草菇(Volvariella volvacea)的锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)基因序列,构建重组质粒pBAR GPE1/Mn-SOD,转化大肠杆菌(Escherichia coli)Stbl3菌株,采用单因素实验对诱导剂IPTG浓度(0、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0 mmol·L-1)、诱导培养时间(0、2、4、6、8、10 h)及MnCl2浓度(0、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0 mmol·L-1)进行优化,以获得最优表达条件。在最优条件下分别进行耐热性、耐冷性及耐盐性分析,测定重组菌pBAR GPE1/Mn-SOD和对照菌pBAR GPE1的SOD酶活力及生长情况。结果表明:最优表达条件为IPTG浓度1 mmol·L-1,诱导培养时间6 h,不需要添加MnCl2;在最优条件下,与对照菌相比,发现重组菌的SOD酶活力显著提高,生长情况较好,提高了转化菌株的耐热性、耐冷性和耐盐性。

• 出版日期2020
• 单位安顺学院; 上海市农业科学院食用菌研究所