空肠弯曲菌粘附蛋白PEB1原核表达、纯化及多克隆抗体制备

作者：简文; 史皆然; 樊爱琳; 薛莹; 李圣青; 柏银兰; 戚好文

来源：武警医学院学报, 2010, (04): 271-273+345.

• 空肠弯曲菌
• 粘附蛋白
• 原核表达
• 纯化
• 多克隆抗体 Campylobacter jejuni
• PEB1 protein
• Prokaryotic expression
• Purification
• Polyclonal antibody

【目的】克隆、表达空肠弯曲菌表面蛋白PEB1,并制备针对该蛋白的多克隆抗体。【方法】采用PCR方法从空肠弯曲菌Penner19标准株基因组中扩增出PEB1蛋白基因,用限制性内切酶消化后插入到pUC-19克隆载体中,测序正确后,再亚克隆到融合表达载体pPro-EXHTb中,转化大肠杆菌DH5α,目的基因经IPTG诱导,由T7启动子调控表达了氨基端带6个连续组氨酸残基的PEB1蛋白,并经Western-blotting证实。然后,在非变性条件下用Ni-NTA亲和色谱柱纯化目的蛋白。用纯化的PEB1蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,用ELISA法检测抗体效价。【结果】在非变性条件下...

• 出版日期2010
• 单位第四军医大学; 西京医院