凝血酶时间法的改进及对四物汤类方筛选研究

作者:刘立; 马宏跃; 段金廒; 唐于平; 宿树兰; 郭建明; 周婧
来源:中国实验方剂学杂志, 2009, (04): 68-71.
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2009.04.028

摘要

目的:改进凝血酶时间(TT)法,使其更适合体外凝血酶抑制剂筛选。并用此方法测定比较四物汤类方及方中代表性成分的抗凝血酶活性。方法:建立凝血酶浓度对lgTT延长率(%)的标准曲线,对影响凝血酶活性的相关因素进行考察,如血浆的储存条件;药物溶媒的选择;药物与凝血酶预温时间。并且测定比较四物汤(SW)、少腹逐瘀汤(SF)、香附四物汤(XF)、桃红四物汤(TH)、芩连四物汤(QL)的抗凝血酶活性。对方中代表性成分的抗凝血酶活性进行测定。结果:获得改进凝血酶时间法的适宜条件;筛选结果显示四物汤类方均有明显的抗凝血酶活性,抑制性的强弱顺序为QL(IC50=1.30 mg.mL-1)>SF(IC50=1.39 mg.mL-1)>XF(IC50=3.55 mg.mL-1)>SW(IC50=8.14 mg.mL-1)>TH(IC50=10.94 mg.mL-1);活性成分槲皮素也具有显著抗凝血酶活性。结论该研究建立了一种凝血酶抑制剂筛选的便捷方法,证实了四物汤类方及成分具有直接抗凝血酶的活性,为深入解析活血化瘀方中靶向凝血酶的活性物质奠定了基础。

全文