杜仲AFLP反应体系的建立及优化

作者：王大玮; 李煜; 周玮; 李周岐

来源：西北农林科技大学学报(自然科学版), 2010, (06): 88-94.

DOI：10.13207/j.cnki.jnwafu.2010.06.013

• 杜仲
• AFLP
• 体系优化
• 引物筛选

【目的】建立并优化适合杜仲的AFLP技术体系,为进一步构建其遗传图谱及开展分子标记辅助育种奠定基础。【方法】对杜仲基因组DNA提取方法、酶切与连接体系、预扩增和选择性扩增程序的影响因素进行分析,并对适合杜仲AFLP分析的引物组合进行筛选。【结果】模板DNA的提取采用改进的CTAB法,酶切模板DNA用量500 ng,酶切时间6 h,连接反应时间6 h,预扩增产物最适稀释倍数30倍。同时筛选出E-AAG+M-CAA,E-AAG+M-CAT,E-AAG+M-CTA,E-AAG+M-CTG,E-ACA+M-CAA,E-ACA+M-CTA,E-ACC+M-CTG共7对适合杜仲AFLP分析的引物组合。【结论】经重复验证,建立的AFLP反应体系适用于杜仲的AFLP分析。

• 出版日期2010-6-10
• 单位西北农林科技大学