CRISPR/Cas9在豆科植物毛根转化中的应用及共生基因的编辑

作者：谭茜; 王龙祥; 张先鹏; 余海翔; 张忠明

来源：华中农业大学学报, 2017, 36(05): 45-51.

DOI：10.13300/j.cnki.hnlkxb.2017.05.008

• CRISPR/Cas9
• 基因组编辑技术
• 定点编辑
• 结瘤因子受体激酶1
• 豆科植物

将CRISPR/Cas9系统与毛根转化相结合,在豆科植物百脉根和大豆中对结瘤因子受体激酶基因NFR1进行多靶点敲除,旨在快速、便捷获得目的基因突变体。结果表明:在百脉根和大豆中均获得了目的基因敲除的突变体;其中,百脉根LjNFR1基因中靶位点1处的敲除效率为58.3%,在靶位点2处的敲除效率为0;大豆GmNFR1靶位点1处的敲除效率为33.3%,靶位点2处的敲除效率为41.7%。进一步测序分析发现,CRISPR/Cas9系统可同时敲除大豆基因组上编码NFR1的2个同源基因(GmNFR1和GmNFR1b),为研究植物体内基因的功能冗余提供了技术支持。同时,CRISPR/Cas9系统在毛根转化中的运用进一步地缩短了获得突变体的周期。

• 出版日期2017
• 单位生命科学技术学院; 华中农业大学; 农业微生物学国家重点实验室