摘要

[目的]探讨雷公藤内酯醇(TPL)对肝癌细胞株HepG2的增殖抑制和凋亡诱导作用及作用机制。[方法]MTT法检测TPL对细胞增殖的影响,Hoechst荧光染色观察凋亡细胞形态变化,AnnexinV/PI流式细胞仪标记法检测TPL对HepG2细胞凋亡作用的影响,Western blot检测caspase-3、8、9与PARP的表达情况。[结果 ]经MTT检测,10、20、40、80nmol/L浓度TPL作用24h后HepG2细胞的抑制率分别为15.2%、22.5%、34.9%和40.7%;48h后抑制率分别为21.5%、34.8%、44.1%和44.8%;72h后抑制率分别为31.6%、47.2%、51.6%和56.0%;抑制作用呈时间和剂量的依赖性。10、20、40、80nmol/L浓度的TPL作用24h的HepG2细胞,hoechst荧光染色显微镜下均出现明显的凋亡细胞;AnnexinV/PI流式细胞仪检测其凋亡率分别为8.89%、9.81%、14.69%和22.04%,对照组凋亡率为7.35%;Western blot结果显示,其caspase-3、9、PARP蛋白活化显影,且均较对照组显影增强,显影强度随TPL浓度的增加而增强,未见caspase-8活化显影。[结论]TPL通过诱导HepG2凋亡发挥增殖抑制作用,其机制可能与caspase-3、9活化有关,即与线粒体通路相关,与caspase-8即死亡受体通路无关。

  • 出版日期2013
  • 单位浙江大学医学院附属第一医院