摘要

目的 建立脐带血清(CBS)培养体系,替代胎牛血清(FBS)体外扩增牙髓干细胞(DPSC)。方法 取各项病原微生物测定皆显示阴性的健康人CBS用作细胞培养。提取健康成人完整且无龋坏的正畸拔除牙或第三磨牙的DPSC,设置四个实验组,其中对照组为含10%FBS培养基培养的DPSC,其他三组分别为含5%、10%、20%CBS培养基培养的DPSC。经由MTT法对比四组细胞增殖速度;对增殖速度最快的一组,通过不同诱导液对其DPSC施以诱导,使其分别分化为脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞,对其多向分化活性加以证实;流式细胞术(FCM)测定细胞表面标记物表达。结果 脐带血清可培养出能够稳定传代的DPSC;MTT结果显示,各组牙髓干细胞在1、3、5、7、9d内均呈现不同程度的生长状态,且呈线性增长,呈“S”型。其中10%CBS组在第7 d后细胞增殖较为明显;培养出的DPSC具有多向分化能力;FCM测定培养出的第3代DPSC表面标记物表达水平,MSCA-1、CD73与CD90为阳性表达,CD34与CD45为阴性表达,与间充质干细胞表面标记物表达特性相符。结论 CBS培养体系于体外条件下对DPSC增殖具促进作用,且培养所得DPSC具备干细胞特性。

  • 出版日期2022
  • 单位杭州市中医院