一种肠杆菌科细菌菌影的高效制备方法

摘要

本发明属于微生物学和基因工程领域，公开了一种肠杆菌科细菌菌影的高效制备方法，包括以下步骤：采用RF克隆方法将噬菌体ID52裂解基因E与温控载体连接，构建温控重组质粒；将所述重组质粒转入大肠杆菌感受态细胞中，以氯霉素为抗性筛选，得到重组大肠杆菌单克隆；将得到的重组大肠杆菌单克隆接种至含有氯霉素的LB液体培养基中振荡培养；当菌液OD600值达到0.8以上时，诱导裂解基因E表达，最后收集诱导表达后的菌影。本发明噬菌体ID52‑E裂解蛋白的裂解活性更强，菌影形成率更高。当起始诱导OD600值达到2.0时，加入诱导剂L‑阿拉伯糖，其OD600值可降低至0.3‑0.4，本发明显著提高了菌影的产量。

关键词