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摘要
目的 探讨脐带间充质干细胞外泌体（MSC-Exo）在脐带血CD34+细胞扩增中的作用。方法 采用差速离心法从人脐带间充质干细胞（hUC-MSC）培养上清中分离提取外泌体，透射电镜观察其形态特征，并采用纳米颗粒跟踪分析技术进行鉴定。利用免疫磁珠分选法从新鲜脐带血中分离获得CD34+造血干/祖细胞（HSPC），接种到24孔板中，在含有干细胞因子（SCF）、血小板生成素（TPO）等细胞因子的StemSpan无血清培养基中，实验组加50μg/ml外泌体，对照组加等体积PBS，分别在培养第6和12天，对HSPC扩增数量计数并进行统计分析；利用流式细胞仪检测2种培养条件下HSPC表面标志的表达情况，并于集落培养12 d后进行造血集落形成实验。结果 脐带血CD34+细胞在培养扩增12 d，实验组细胞扩增数量是对照组的1.88倍，两者差异显著（P<0.01）；进一步分析表明，培养至第6和12天，实验组中原始造血干细胞（pHSC）(CD34+CD38-CD90+CD45RA-CD49f+)的数量分别是对照组的2.13和3.17倍，差异具有统计学意义（P<0.05）；造血集落形成实验显示，集落培养12 d，实验组细胞形成的造血集落数量显著高于对照组，特别是代表原始造血分化潜能的混合系集落形成单位（CFU-GEMM）数量显著提高，是对照组的1.9倍，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 添加脐带MSC-Exo的无血清培养体系，对HSPC的扩增具有更强的促进能力，并能有效提高扩增产物中pHSC的比例。
- 出版日期2022
- 单位华南生物医药研究院
