地衣芽胞杆菌ATCC9945A中γ-聚谷氨酸降解酶基因的克隆、表达及降解性能鉴定

作者：王计伟; 施庆珊; 欧阳友生; 胡文锋; 陈仪本

来源：生物技术, 2012, (01): 13-18.

• 地衣芽孢杆菌ATCC9945A
• γ-PGA降解酶基因
• 克隆表达
• 降解性能 Bacillus licheniformis ATCC9945A
• γ-PGA degrading enzyme gene
• clone and expression
• degradation

目的:验证在地衣芽胞杆菌ATCC9945A中存在着γ-聚谷氨酸降解酶基因(ywtD),为下一步解决在γ-聚谷氨酸微生物发酵合成过程中产物γ-PGA降解的技术性难题提供依据。方法:通过在pET-28b( )大肠杆菌表达系统克隆表达地衣芽孢杆菌ATCC9945A中的ywtD基因,对诱导表达条件进行优化,采用SDS-PAGE和Western Blot方法检测目的蛋白的表达,并体外酶解实验验证其活性。结果:PCR扩增得到了一个1 245bp的基因片段,预期编码414个氨基酸,诱导表达后得到一个分子量大小约为45.6 kDa的表达产物。Western Blot分析结果表明ywtD基因得到了有效表达。体外...

• 出版日期2012
• 单位华南农业大学; 广东省微生物研究所