禽腺病毒血清型4通过JAK/STAT信号通路调控鸡胚心脏成纤维细胞炎症反应的研究

作者：冯孝傲; 尹德晶; 朱二鹏; 宋春; 文明; 岳筠; 程振涛^*

来源：中国预防兽医学报, 2023, 45(10): 1038-1044.

• 禽腺病毒血清型4
• JAK/STAT信号通路
• 炎症反应
• 心脏成纤维细胞

为探究禽腺病毒血清型4 (FAdV-4)感染鸡胚心脏成纤维细胞(CEF)后调控该细胞中炎症因子反应的机制，本研究以MOI 5 FAd V-4贵州分离株(GZ-QL)感染鸡胚心脏CEF细胞，采用荧光定量PCR(qPCR)检测FAd V-4感染后CEF细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α基因的转录水平；采用western blot检测FAd V-4感染后CEF细胞中不同时间段JAK/STAT信号通路关键蛋白JAK2和p-JAK2的表达情况；以40μmol/L JAK/STAT信号通路抑制剂Ruxolitinib预处理CEF细胞2 h后，将FAd V-4按MOI 5感染CEF细胞，在感染后不同时间分别收集细胞和上清，采用western blot检测Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞中不同时间段JAK/STAT信号通路关键蛋白JAK2和p-JAK2的表达情况；采用q PCR检测Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α基因的转录水平；采用ELISA检测Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞上清中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的表达水平。结果显示，与不感染FAd V-4的空白对照细胞相比，FAd V-4感染CEF细胞后IL-6和IL-8基因的转录水平均极显著上调(P<0.01),IL-1β基因的转录水平在后期显著上调(P<0.05),TNF-α基因的转录水平在前期无变化，后期极显著上调(P<0.01);western blot结果显示，与空白对照细胞相比，FAd V-4感染CEF细胞后p-JAK2蛋白的表达水平均极显著升高(P<0.01)，且48 h p-JAK2蛋白的表达水平最高。Western blot结果显示，与FAd V-4感染组相比，Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞及Ruxolitinib处理的CEF中p-JAK2蛋白的表达水平均极显著降低(P<0.01),Ruxolitinib组与空白对照组无显著差异；q PCR结果显示，与FAd V和空白对照组相比，Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8基因的转录水平均极显著上调(P<0.01),TNF-α基因的转录水平显著上调(P<0.05);ELISA结果显示，与FAd V和空白对照组相比，Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞中炎症因子IL-8分泌水平极显著上调(P<0.01),TNF-α分泌水平显著上调(P<0.05)、IL-1β和IL-6分泌水平无显著变化，与转录水平结果基本一致。本研究上述结果首次证实FAd V-4可以诱导鸡胚心脏CEF细胞产生强烈的炎症反应，并激活了该CEF细胞中的JAK/STAT信号通路，该研究结果为深入阐明FAd V-4感染心脏细胞的致病机制提供一定的参考依据。

• 出版日期2023
• 单位贵州大学; 动物科学学院