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摘要
目的构建癌基因p28GANK缺失不同ankyrin序列的突变体,进一步研究p28GANK的功能及在肝癌发生发展中的作用。方法利用QuikChangSite-DirectedMutagenesisKit构建p28GANK5个ankyrin缺失突变体并检测各个突变体对p53的影响。结果构建出分别缺失第1个ankyrin(39～71aa)、第2个ankyrin(72～104aa)、第3个ankyrin(105～137aa)、第4个ankyrin(138～170aa)和第5个ankyrin(171～203aa)的突变体,琼脂糖凝胶电泳及蛋白免疫印迹法验证正确。野生型p28GANK可促进p53降解,其他突变体对p53的表达无明显影响。结论成功构建了p28GANK的5个突变体,证实p28GANK对p53的调控需要全部的ankyrin序列,为ankyrin的研究和p28GANK对肝癌的调控作用研究奠定了基础。
- 出版日期2010
- 单位中国人民解放军第二军医大学
