大肠杆菌O157∶H7实时定量PCR检测方法的建立

作者：李军; 谢宇舟; 禤雄标; 陈泽祥; 杨威; 马春霞; 胡帅; 彭昊; 许力干; 谢永平; 潘艳

来源：畜牧与兽医, 2011, 5-9.

• 大肠杆菌O157∶H7
• 实时定量PCR
• Flic(H7)基因

根据GenBank公布的大肠杆菌O157∶H7的Flic(H7)基因序列进行同源性比较分析,选择保守序列设计一对特异性扩增引物,通过优化反应条件,建立一个用于大肠杆菌O157∶H7快速定量检测的实时定量PCR方法。该方法的最低检测极限是103CFU/mL,敏感性比常规PCR提高10倍。方法重复性好、特异性强,重复性检测的变异系数均小于2%;只能检测大肠杆菌O157∶H7,对非大肠杆菌O157∶H7血清型细菌、猪链球菌2型、副猪嗜血杆菌无反应。利用此方法对模拟样本进行定量检测,其结果与平板细菌计数基本一致,表明此方法可作为大肠杆菌O157∶H7快速诊断和疫情监测的一种快速、准确、简便的检测工具。

• 出版日期2011-5-10
• 单位广西壮族自治区兽医研究所