雷帕霉素对人角质形成细胞系HaCaT细胞自噬诱导效应及其分子机制的初步研究

作者：陈旭; 徐松; 黄丹; 鞠梅; 陈崑; 李新宇; 顾恒

来源：临床皮肤科杂志, 2014, (05): 267-271.

DOI：10.16761/j.cnki.1000-4963.2014.05.018

• 雷帕霉素
• 角质形成细胞
• 自噬 rapamycin
• keratinocyte
• autophagy

目的:初步探讨雷帕霉素在不同浓度和不同孵育时间下,对人角质形成细胞系HaCaT细胞自噬的诱导效应及其分子机制。方法:不同浓度雷帕霉素处理HaCaT细胞4 h或12 h后,利用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测雷帕霉素对细胞活力的影响,并提取蛋白进行蛋白印迹实验,检测LC3-Ⅱ表达水平,作为自噬的检测方法;通过透射电镜分析自噬体形成,确认雷帕霉素对自噬的诱导效果。检测自噬调控上游关键元件哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白表达及其se~(2481)和ser~(2448)磷酸化产物水平,分析mTOR活性;并分析自噬调控下游的另一关键基因Atg7的表达,初步分析雷帕霉素诱导HaCaT细胞的分子机制。...

• 出版日期2014
• 单位中国医学科学院北京协和医院