脐静脉内皮细胞外泌体和内皮祖细胞外泌体对hDPSCs增殖及迁移能力的比较研究

作者：张雪; 徐兆莹; 蒋鹏飞; 潘爽^*

来源：口腔医学, 2022, 42(11): 979-989.

DOI：10.13591/j.cnki.kqyx.2022.11.004

• 脐静脉内皮细胞
• 内皮祖细胞
• 人牙髓干细胞
• 外泌体
• 牙髓再生

目的 将人脐静脉内皮细胞外泌体(human umbilical vein endothelial cells-derived exosome, HUVECs-exo)和内皮祖细胞外泌体(endothelial progenitor cells-derived exosome, EPCs-exo)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells, hDPSCs)增殖和迁移能力的影响进行比较研究，以期为外泌体在牙髓再生中的应用积累经验。方法 采用超速离心法分离提取外泌体，透射电镜观察外泌体形态，纳米粒子跟踪分析技术(nanoparticle tracking analysis, NTA)检测外泌体粒径大小，Western blot蛋白印迹检测外泌体标志蛋白CD9、CD63、TSG101的表达。将两种外泌体按照5、10、20μg/mL浓度梯度分别作用于hDPSCs,通过CCK-8实验检测hDPSCs增殖能力，细胞划痕实验和Transwell实验检测hDPSCs迁移能力。结果 透射电镜下观察两种外泌体均呈圆盘状，粒径集中在30～150 nm,阳性表达CD9、CD63、TSG101三种标志蛋白。与对照组(Control组)相比，两种外泌体在不同浓度下均对hDPSCs增殖能力无显著促进作用，差异无统计学意义(P>0.05)。细胞划痕实验和Transwell实验表明，与对照组相比，两种外泌体均可促进hDPSCs迁移，差异有统计学意义(P<0.05),其中10μg/mL外泌体浓度作用效果最明显(P<0.01)。相同浓度的两种外泌体组间作用效果差异无统计学意义(P>0.05)。结论 本实验成功分离提取到两种细胞来源的外泌体并进行鉴定，将不同浓度的两种细胞来源的外泌体作用于hDPSCs,发现对其增殖能力无明显促进作用，但可以促进其迁移，尤以10μg/mL外泌体浓度促进迁移效果最为明显。

• 出版日期2022
• 单位哈尔滨医科大学; 哈尔滨医科大学附属第一医院