抗菌肽-Mt6的理化特性和抗菌活性及联合抗真菌药物对白色念珠菌的作用

作者：黄敏慧; 曾晔; 张迎春; 李彩多; 吴建伟; 陈峥宏; 王涛^*

来源：贵州医科大学学报, 2023, 48(06): 627-633.

DOI：10.19367/j.cnki.2096-8388.2023.06.002

• 白色念珠菌
• 家蝇抗真菌肽-1A
• 分子改造
• 抗菌肽-Mt6
• 抗菌活性
• 联合抗菌实验

目的 探讨抗菌肽-Mt6(AMPs-Mt6)的理化特性、抗菌活性及联合抗真菌药物对白色念珠菌(C.albicans)的作用。方法 以家蝇抗真菌肽-1A(MAF-1A)为模板，采用氨基酸残基替换法设计AMPs-Mt6,并以生物信息学方法分析其理化特性；挑取对数生长期C.albicans、金黄色葡萄球菌(S.aureus)、枯草杆菌(B.subtilis)、大肠埃希菌(E.coli)、铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)、甲型副伤寒沙门菌(S.paratyphi)及肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)菌落制备细胞悬液，取菌液100μL和相同体积不同终浓度(156.25～2 500.00 mg/L)的AMPs-Mt6稀释液混匀，采用微量肉汤稀释法检测AMPs-Mt6对上述各菌属的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀真菌浓度(MFC)及最小杀细菌浓度(MBC);取(0.5～2.5)×106 cfu/L的C.albicans菌液100μL和相同体积不同终浓度(0.25～64.00 mg/L)的氟康唑(FLC)、两性霉素B(AmB)、伊曲康唑(ITC)及5-氟胞嘧啶(5-FC)药物稀释液混匀，采用微量肉汤稀释法检测上述各药物对C.albicans的MIC和MFC;采用棋盘格法检测AMPs-Mt6分别与FLC、AmB、ITC、5-FC联合使用时对C.albicans的体外抑制活性，并以部分抑菌浓度指数(FIC index)判定联合效应。结果 AMPs-Mt6为带有9个正电荷数、疏水性为0.451、α-螺旋占比81%的两亲性多肽；AMPs-Mt6对C.albicans的MIC为312.50 mg/L,对所检测细菌均有抗菌作用，对S.aureus、B.subtilis及P.aeruginosa的MIC为625.00 mg/L,对E.coli、S.paratyphi、K.pneumoniae的MIC为1 250.00 mg/L;AMPs-Mt6与AmB、ITC及5-FC联合时，FIC index值分别为0.19、0.36及0.37,表现为协同效应；AMPs-Mt6与FLC联合时，FIC index值为0.63,为相加效应。结论 与模板肽MAF-1A相比，AMPs-Mt6的理化性质得到优化，抗菌活性和抗菌谱增强，与抗真菌药FLC、AmB、ITC及5-FC联用可增强各药物对C.albicans的抑杀效果。

• 出版日期2023
• 单位基础医学院; 贵州医科大学