饲养层FGF2表达量对猕猴胚胎干细胞自我更新及多能性的影响

作者：张敬; 魏强; 卢斌; 陈永昌; 陈洪伟; 李荣荣; 王喜宏; 季维智

来源：动物学研究, 2008, 29(04): 405-414.

DOI：10.3321/j.issn:0254-5853.2008.04.008

• 猕猴
• FGF2
• 饲养层
• 胚胎干细胞
• 增殖

用转基因和RNA干扰(RNAi)法建立5组不同成纤维细胞生长因子-2(fibroblast growth factor-2,FGF2)表达量的猕猴耳部皮肤成纤维细胞(MESF)系:过表达FGF2组(f1),过表达的阴性对照组(f2),FGF2RNA干扰组(f3),RNA干扰的阴性对照组(f4)和未作任何处理的对照组(f5)。5组MESF的FGF2表达量相对值为f1:f2:f3:f4:f5=4∶2∶1∶2∶2;c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlin1在f1中表达量上升,在f3中表达量下降;BMP4,TGF-β2在f1中表达量下降,在f3中表达量上升;表明内源FGF2能够作用于MESF的TGF-β信号通路,引起相关基因表达量的变化。用这些细胞作为饲养层长期培养(10代)猕猴胚胎干细胞(RhESC),结果在f1上培养的RhESC增殖速度都比对照组快,并且c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlin1,Oct-4,Nanog,Sox2表达量均上升,BMP4表达下调;在f3上培养的RhESC增殖较慢,BMP4表达上调,c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlin1,Oct-4,Nanog,Sox2表达下调。5组MESF上培养的RhESC形成的EB均表达各胚层早期标记基因(marker),说明RhESC的多能性没有受到影响,但表达量有差异,f1上RhESC形成的EB所有marker都低表达。结果表明饲养层的FGF2含量不仅影响自身相关基因的表达,还对RhESC的自我更新有一定的作用。

• 出版日期2008
• 单位中国科学院昆明动物研究所