大肠杆菌表达的重组猪β_2微球蛋白二级结构的圆二色谱分析

作者：高凤山; 夏春; 张强; 李云岗; 李新生; 许崇波; 白婧

来源：微生物学报, 2009, 49(12): 1596-1600.

DOI：10.3321/j.issn:0001-6209.2009.12.008

• 二级结构
• 圆二色谱
• β2微球蛋白

【目的】研究巴马小型猪β2微球蛋白(β2m)的结构和功能。【方法】亚克隆巴马小型猪β2m的成熟肽部分,并构建与pMAL-p2X的重组质粒,转化大肠杆菌TB1并诱导后,融合表达蛋白分别经过Western blot、纯化及Factor Xa切割,分离纯化单体蛋白。圆二色谱(circular dichroism spectrum,CD)测定蛋白的二级结构。【结果】重组表达的融合蛋白MBP-β2m大小为53.1kDa。切割后去除MBP的单体蛋白大小为10.6kDa。圆二色谱分析单体蛋白β2m二级结构元件α-螺旋、β-折叠、转角和随机卷曲所含有的氨基酸残基数目分别为0、45、8和45。【结论】分析揭示表达的β2m具有正确的二级结构,可以用于体外多肽结合等研究。

• 出版日期2009
• 单位农业部; 生物工程学院; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 中国农业大学; 山东省动物疫病预防与控制中心; 大连大学