地西泮单克隆抗体的制备及其酶联免疫吸附检测方法的建立

作者：李桂敏; 宁保安; 白家磊; 赵丽; 赵翠娇; 高志贤

来源：食品安全质量检测学报, 2014, (03): 956-963.

• 地西泮
• 杂交瘤技术
• 单克隆抗体
• 酶联免疫吸附法 diazepam
• hybridoma technology
• monoclonal antibody
• enzyme-linked immunosorbent assay

目的制备地西泮(diazepam,DZP)单克隆抗体,并且对制备的抗体进行一系列性质鉴定。方法利用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐[1-ethyl-3-(3-dimethyllaminopropyl)carbodi imide hydrochloride,EDC·HCl]法合成免疫原和包被原,用免疫原免疫Balb/C小鼠,当效价到1:16000以后取小鼠脾脏与SP2/0进行细胞融合。然后采用竞争结合双阳性两步筛选法,筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞,并且利用有限稀释亚克隆方法得到单株细胞,采用体内诱生法制备腹水型单克隆抗体。利用辛酸-饱和硫酸铵法对腹水型抗体进行纯化,利用酶联免...

• 出版日期2014
• 单位中国人民解放军军事医学科学院